在畜禽生產中，抗生素作為促生長劑在全世界范圍廣泛使用，保證了畜禽業的快速發展，但隨著人們對食品安全與健康的重視，抗生素的使用所帶來的種種問題如細菌耐藥性、抗生素殘留等受到越來越多的關注。2006年歐盟禁止所有抗生素在動物生產中使用，這就更加促使我們去尋求安全有效的抗生素替代品，如草本精油、益生元、益生菌以及有機酸等[1-2]。植物精油因其具有抑菌、抗氧化、調節免疫、促進生長、改善腸道內環境等方面的優點而成為研究熱點[3]。國外對植物精油生物活性的研究起步較早，已取得一定成果，并逐步深入到作用機理的細胞、分子層面[4]，而國內相關研究較少，主要集中于植物精油對豬、肉雞生產性能以及腸道功能的影響方面[5-7]。本試驗旨在研究在飼糧中添加不同水平的植物精油混合物(essential oil mixture，EOM)對海蘭褐蛋雞生產性能、蛋品質、卵泡發育及血清生殖激素指標的影響，以期為其在蛋雞生產中的推廣應用提供理論參考。
植物精油混合物由上海美農生物科技股份有限公司提供，主要成分為肉桂醛(18%)、香芹酚(3%)、百里香酚(1%)，以二氧化硅為載體，由棕櫚油包被而成。
選取體重和產蛋率接近的25周齡健康海蘭褐蛋雞432只，隨機分成4組，每組6個重復，每個重復18只雞。預試期3周，正試期12周。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎飼糧，試驗組分別飼喂在基礎飼糧中添加75、150和225 mg/kg植物精油混合物的試驗飼糧。基礎飼糧參考NRC(1994)[8]家禽營養需要和我國《雞飼養標準》(NY/T 33—2004)配制，其組成及營養水平見表 1。
試驗在中國農業科學院家禽研究所試驗基地進行。采用3層階梯式籠養，每天定時飼喂2次(08：00、15：00)。自由采食、飲水，常規飼養。各組飼養管理條件保持完全相同，參考美國海蘭公司推薦飼養方法飼養管理。
試驗期間每天以重復為單位準確記錄產蛋數、蛋重和雞只死亡數。每周進行結料并記錄耗料量。計算產蛋率、采食量、產蛋量、蛋重和料蛋比。
在試驗結束時，每個重復隨機選取6只雞蛋測定蛋品質，包括蛋形指數、蛋殼顏色、蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋白高度、蛋黃顏色、哈氏單位、蛋黃比例、蛋殼比例、蛋白比例。
哈氏單位=100×log(H-1.7W0.37+7.57)。
式中：H為濃蛋白高度(mm)；W為蛋重(g)。
主要儀器設備包括：CM-2300d分光測色計(日本MINOLTA公司)、電子數顯卡尺(廣陸數字測控股份有限公司)、多功能蛋品質測定儀、蛋殼厚度測定儀、蛋殼強度測定儀(以色列ORKA公司)。
在試驗結束時，每個重復隨機選取2只蛋雞稱重后進行翅靜脈采血，記錄后屠宰，肉眼觀察記錄等級卵泡、閉鎖卵泡、小黃卵泡以及大白卵泡的數量，并測量輸卵管長度。計算輸卵管相對長度：
輸卵管相對長度(cm/kg)=輸卵管長度(cm)/蛋雞活重(kg)。
試驗結束時將采集的血液離心制作血清，測定血清中生殖激素含量，包括催乳素、孕酮、雄激素、促卵泡素、促黃體素以及雌二醇。血清生殖激素指標測定均采用放射免疫測定(RIA)法，試劑盒均購自北京北方生物技術研究所，具體方法參照說明書進行。
所有數據經Excel 2010軟件初步處理后，用SPSS 20.0單因素方差分析，結果以“平均值±標準差”表示，采用單因素方差分析(one-way ANOVA)檢驗組間差異顯著性，再進行LSD多重比較，以P < 0.05為差異顯著判斷標準。
植物精油混合物對蛋雞生產性能的影響見表 2。150 mg/kg植物精油混合物組蛋重顯著高于對照組(P < 0.05)。各組間產蛋率、采食量、產蛋量和料蛋比無顯著差異(P>0.05)。150 mg/kg植物精油混合物組的產蛋率、采食量最高，而225 mg/kg植物精油混合物組的料蛋比最低。
植物精油混合物對蛋雞蛋品質的影響見表 3。各組間蛋雞蛋形指數、蛋殼顏色、蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋黃顏色、蛋黃比例、蛋白比例無顯著差異(P>0.05)。75和150 mg/kg植物精油混合物組的哈氏單位顯著高于225 mg/kg植物精油混合物組(P < 0.05)；150 mg/kg植物精油混合物組的蛋白高度最高，顯著高于225 mg/kg植物精油混合物組(P < 0.05)；225 mg/kg植物精油混合物組的蛋殼比例顯著高于其他各組(P < 0.05)。
植物精油混合物對蛋雞卵泡發育的影響見表 4。各組間等級卵泡、閉鎖卵泡、小黃卵泡以及大白卵泡的數量無顯著差異(P>0.05)，且各組間輸卵管相對長度也無顯著差異(P>0.05)。
植物精油混合物對蛋雞血清生殖激素指標的影響見表 5。225 mg/kg植物精油混合物組的血清孕酮含量顯著高于對照組(P < 0.05)。各組間催乳素、雄激素、促卵泡素、促黃體素以及雌二醇含量無顯著差異(P>0.05)。
本試驗結果顯示，飼糧添加150 mg/kg植物精油混合物后蛋重顯著增加，這與Bölükbasi等[9]的研究結果一致，而Metin等[3]和Bozkurt等[10]研究結果均顯示飼糧精油并沒有顯著增加蛋重。本試驗中，飼糧添加植物精油混合物對蛋雞產蛋率、采食量、產蛋量和料蛋比無顯著影響。此外，而Bölükbasi等[11]的研究結果顯示，飼糧添加百里香精油后對蛋雞的料蛋比無顯著影響；Florou-Paneri等[12]研究表明，飼糧添加牛至精油對采食量無顯著影響。但Ma等[13]和Metin等[3]研究結果顯示，飼糧添加精油能顯著提高產蛋量和料蛋比。這可能與用于試驗的精油成分復雜、含量不同有關，也有可能是本試驗添加水平和飼養環境的原因未能發揮出精油對于蛋雞生產性能的最佳作用[14]。
Bozkurt等[10]研究了植物精油混合物對緩解蛋雞高溫應激的影響，結果顯示飼糧中添加植物精油混合物能顯著降低蛋雞死亡率，顯著增加蛋殼重量。這與本試驗225 mg/kg植物精油混合物組蛋殼比例顯著高于其他各組的結果一致。精油的添加可以提高蛋殼比例，這可能因為添加精油能夠促進有益菌的增加，因而腸道對礦物質的吸收能力增強，尤其是鎂離子(Mg2+)和鈣離子(Ca2+)，因此蛋殼比例增加[15]。飼糧添加植物精油混合物對蛋黃顏色和蛋黃比例的影響并不顯著，這與Bozkurt等[10]的結果一致，但有研究表明香芹酚能夠通過介導肝臟的調節機制以促進卵黃前體物質從肝臟轉移，進而導致蛋黃比例的增加[16-17]。分析可能是由于用于研究的植物精油混合物的成分不一致，本試驗所用植物精油混合物的主要成分是肉桂醛、百里香酚等，而其他研究[16-17]所用精油中香芹酚的含量較大。蛋白高度和哈氏單位是確定蛋品質的重要指標，本試驗結果顯示，150 mg/kg植物精油混合物組的蛋白高度最高，顯著高于225 mg/kg植物精油混合物組；75、150 mg/kg植物精油混合物組的哈氏單位顯著高于225 mg/kg植物精油混合物組，說明飼糧添加植物精油混合物能改善蛋白品質，但添加水平不宜過高。這與Metin等[3]的結果不一致，可能與用于研究的精油成分不一致有關。植物精油混合物能改善蛋白品質的原因可能是在蛋的形成過程中，植物精油混合物的作用影響輸卵管腺體分泌的濃蛋白的含量以及成分，具體機制需要進行進一步的研究。
本試驗結果顯示，各組間等級卵泡、閉鎖卵泡、小黃卵泡以及大白卵泡的數量無顯著差異，而飼糧添加物精油混合物能夠增加血清中孕酮的含量，而對其他血清生殖激素如催乳素、雄激素、促卵泡素、促黃體素以及雌二醇含量無顯著影響，對輸卵管相對長度也無顯著影響。這說明植物精油混合物對卵泡發育以及輸卵管長度的影響較小，而飼糧添加植物精油混合物后孕酮含量增加。有研究顯示，孕酮可以抑制血鈣含量的升高，促進鈣轉運至輸卵管，能夠增加蛋殼厚度，增強蛋殼強度[18]，而這與本試驗的結果相符合，本試驗結果顯示225 mg/kg植物精油混合物組的血清孕酮含量顯著高于其他各組，且其蛋殼比例也顯著高于其他各組，蛋殼強度和蛋殼厚度也達到了最高值。有關飼糧添加植物精油混合物對血清孕酮含量以及蛋殼間的分子作用機制仍需進行進一步的研究。
飼糧添加150 mg/kg植物精油混合物可改善蛋雞的蛋重及蛋白品質，且對卵泡發育的影響較小。
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