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畜牧人

標(biāo)題: 羊發(fā)情調(diào)控技術(shù)研究進展 [打印本頁]

作者: chenxiaoyong    時間: 2008-6-22 17:02
標(biāo)題: 羊發(fā)情調(diào)控技術(shù)研究進展
羊發(fā)情調(diào)控技術(shù)研究進展
羊發(fā)情調(diào)控(control of estrus)技術(shù)是指利用外源激素或采取其他管理措施對母羊進行處理,有意識的控制母羊發(fā)情和配種,充分發(fā)掘優(yōu)良種羊的繁殖潛力,便于生產(chǎn)和管理,獲取最大的經(jīng)濟利益。羊的發(fā)情調(diào)控技術(shù)包括初情期調(diào)控技術(shù),誘導(dǎo)發(fā)情和同期發(fā)情技術(shù)。
1.初情期的調(diào)控
初情期的調(diào)控(control of puberty)是指利用激素處理,使性未成熟母羊的卵巢發(fā)育和卵泡發(fā)育并能達到成熟階段甚至排卵。在自然情況下,初情期前母羊的卵巢上的卵泡雖能夠發(fā)育至一定階段,但不能發(fā)育至成熟,可能是由于下丘腦-垂體-性腺反饋機制尚未健全,垂體不能分泌足夠量的促性腺激素(Gn)剌激卵巢活動。但試驗表明,性成熟前母羊卵巢具備了受適量Gn剌激后,其卵泡能發(fā)育至成熟的潛力。
初情期調(diào)控技術(shù)主要應(yīng)用于世代間隔長的動物育種,以期縮短優(yōu)良母畜的世代間隔,用于研究性未成熟母羊卵巢活動情況及對Gn的反應(yīng)、卵泡發(fā)育潛能、卵子發(fā)育及受精能力等,在羊上報道和應(yīng)用較少。
1.1初情期調(diào)控方法

誘導(dǎo)未成熟羊的發(fā)情方法與誘導(dǎo)性成熟乏情羊發(fā)情方法類似,只是用藥劑量減少至30%-70%,由于性未成熟母羊卵巢上無黃體,沒有卵泡波出現(xiàn),因此不受季節(jié)等其他因素影響,任何時候都可以用Gn實施。對3月齡性未成熟山羊可用2.5mg FSH分3日6次給藥,取得了較好的結(jié)果;也可一次肌注500IU~750IU PMSG。Hamra用含60mg孕激素(MAP)的海綿陰道栓處理8月~10月齡性未成熟綿羊(當(dāng)?shù)匮蛲ǔ?7~18月齡配種)14天,取陰道栓時注射500IU HCG,取得60%的受胎率。

2.誘導(dǎo)發(fā)情

誘導(dǎo)發(fā)情 (induction of estrus) 是對因生理(非繁殖季節(jié)、產(chǎn)后乏情)和病理(持久黃體、卵巢萎縮、幼稚型卵巢)原因不能正常發(fā)情的性成熟母羊,用激素和采取一些管理措施,使之發(fā)情的技術(shù)。
誘導(dǎo)乏情母羊發(fā)情,大多數(shù)是用激素處理。而母羊的性活動是在神經(jīng)和內(nèi)分泌的雙重協(xié)調(diào)控制下實現(xiàn)的,一些情況下,非激素處理亦可達目的,如非繁殖季節(jié)以人工光照誘發(fā)母綿羊發(fā)情,在繁殖季節(jié)即將到來時,將公羊與母羊混群,促使母羊發(fā)情周期提早到來;激素處理促使母畜發(fā)情的作用是直接、明顯和時間較確定的,非激素的誘因則是間接、延緩和時間不確定的。
2.1綿羊的誘導(dǎo)發(fā)情
綿羊?qū)儆谳^為嚴(yán)格的季節(jié)性繁殖動物,在休情期內(nèi)或產(chǎn)羔后不久作誘導(dǎo)發(fā)情處理,可使母羊發(fā)情和配種受胎,從而增加母羊年產(chǎn)羔數(shù),實現(xiàn)兩年三胎。對于那些發(fā)情季節(jié)到來后仍不發(fā)情的母羊,亦可通過處理保證其有正常的繁殖能力。
綿羊激素誘導(dǎo)發(fā)情,主要用孕激素預(yù)處理14d~18d(藥棒埋植或陰道栓),處理結(jié)束前1d~2d或當(dāng)天肌注500IU~1000IU PMSG(或約10IU/kg體重)。如Wheaton用含400mg孕酮的海綿陰道栓處理乏情綿羊,結(jié)合注射600IU~700IUPMSG或GnRH,取得最高61%的產(chǎn)羔率。1999年,張居農(nóng)等人用對比實驗證實了對非繁殖季節(jié)母羊采用孕酮復(fù)合制劑,非繁殖季節(jié)的PRID(氟孕酮陰道海棉栓)和撤栓前一天注射PMSG,誘導(dǎo)母羊發(fā)情,提高了排卵率,高達159%,繁殖率達129%。高慶華等(2000)對深度乏情的未斷奶卡拉庫爾母羊頸部肌注復(fù)合孕酮制劑2mL同時陰道放置非繁殖季節(jié)氟孕酮陰道緩釋裝置,內(nèi)含F(xiàn)GA50mg,埋植13d,在撤栓的同時肌注PMSG400mL,2~4d發(fā)情同期率93.3%。楊梅等人于20045月在羊非繁殖季節(jié)利用CIDR + PMSG對綿羊進行同期發(fā)情處理試驗,埋植CIDR 7d ,埋栓的第6d ,肌肉注射PMSG500 單位和PGF2α0.2mg ,7d 撤栓,撤栓后24h 肌肉注射LH 100 單位。結(jié)果在卵巢上出現(xiàn)卵泡或排卵的羊占處理羊數(shù)的97.44 %;出現(xiàn)紅體(排卵) 的羊占處理羊的88. 46 %;平均排卵數(shù)1. 84 ±0. 11 ;得出結(jié)論:利用埋植CIDR + PMSG同期化處理綿羊, 完全可以對乏情期的綿羊進行同期發(fā)情處理,而且可采用定時輸精,無需通過試情公羊來鑒定母羊發(fā)情,可以減少勞動力。
孕激素預(yù)處理結(jié)合PMSG,在誘導(dǎo)季節(jié)性乏情綿羊發(fā)情方面,效果較結(jié)合FSH好。可能是PMSG半衰期長,而季節(jié)性乏情的母羊需長時間的Gn處理才能促使其卵泡發(fā)育,但效果也不如PMSG。
單獨用PMSG也可引起卵泡發(fā)育和排卵,但往往無明顯發(fā)情表現(xiàn)。孕激素預(yù)處理期間對下丘腦和垂體分泌有抑制作用,處理結(jié)束后抑制解除,對下丘腦分泌GnRH和垂體分泌Gn有很強促進作用。
除使用孕激素處理外,2003年劉喜生等報道在發(fā)情季節(jié)使用三合激素對綿羊進行誘導(dǎo)發(fā)情得到了90.0%的同期率,認(rèn)為三合激素同樣可以誘導(dǎo)綿羊發(fā)情。
2.2山羊的誘導(dǎo)發(fā)情
山羊的誘導(dǎo)發(fā)情方法與綿羊的相似,以用孕激素處理為主,處理的時間有11d或21d。處理11d各月份都能較好地誘發(fā)母羊發(fā)情、配種,獲得較高的受胎率。而處理21d反而效果稍差。孕激素處理山羊誘導(dǎo)發(fā)情,在孕激素停藥前2d肌注500IU~700IU PMSG,可明顯提高發(fā)情率和受胎率。趙永聚等2003年試驗認(rèn)為在孕激素陰道拴撤栓同時注射PGF2α0.05-0.1mg可縮短撤栓與發(fā)情開始時間,并延長發(fā)情持續(xù)時間。
3.同期發(fā)情
同期發(fā)情(synchronization of estrus)是利用激素對群體母羊處理使之在較集中的時間內(nèi)發(fā)情的技術(shù),也稱發(fā)情同期化(estrus synchronization)。應(yīng)用同期發(fā)情技術(shù)有利于人工授精技術(shù)的推廣,提高繁殖率;促進品種改良;便于組織和管理生產(chǎn),節(jié)約配種經(jīng)費;作為其他繁殖技術(shù)和科學(xué)研究的輔助手段。
3.1同期發(fā)情技術(shù)原理

母羊的一個發(fā)情周期中,黃體期約占整個發(fā)情周情的70%左右,黃體分泌的孕酮對卵泡發(fā)育成熟有很強的抑制作用。只有黃體消退后,孕酮下降,卵泡才能發(fā)育至成熟,母羊才能表現(xiàn)發(fā)情。因此,控制黃體的消長,是控制母羊發(fā)情的關(guān)鍵,已知的控制黃體消長的途徑有兩個:制造人為的黃體期和消除黃體。
制造人為的黃體期是用孕激素處理,使母羊卵巢上的黃體自然消退,由于外源孕激素的作用,卵泡發(fā)育成熟受到抑制,而外源孕激素作用期間不影響黃體的自然消退。如果外源孕激素作用的時間足夠長,則處理期間所有母羊的黃體都會消退而無卵泡發(fā)育至成熟。停藥后,抑制解除,就可能在同一時期內(nèi)出現(xiàn)發(fā)情、排卵。
消除卵巢上黃體有效、便捷的方法是肌注PGF2α及其類似物,PGc是目前最有效的PG制劑。PG處理后,促進黃體溶解使孕酮水平下降,卵泡發(fā)育趨向一致,從而導(dǎo)致同期發(fā)情。
3.2同期發(fā)情技術(shù)發(fā)展歷程

羊同期發(fā)情研究始于20世紀(jì)50年代,1956年,Robinson開始用注射法使用孕酮對綿羊進行同期發(fā)情處理。1964年,Dziuk等和Hincls相繼用口服、皮下埋植孕酮進行綿羊同期發(fā)情。早期的處理方法以口服或注射一定量的孕激素,持續(xù)16d~20d,因受胎率僅為正常配種的約70%,未能顯示其經(jīng)濟效益,因而沒有受到重視。
20世紀(jì)60年代后,生殖生理和生殖內(nèi)分泌方面的知識迅速積累,多種經(jīng)濟有效的激素制劑上市,為同期發(fā)情技術(shù)研究及應(yīng)用奠定了堅實的基礎(chǔ)。同期發(fā)情技術(shù)在生產(chǎn)上得以推廣利用正式開始于1965年Robinson采用陰道海綿栓埋植孕酮法進行的同期發(fā)情。
20世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)PGF2α的溶黃體作用后,又開辟了另一類同期發(fā)情的途徑。使用PGF2α及其高效類似物PGc一次或二次用藥以及結(jié)合孕激素的方法。1970年Scaramuzzi,1971年Barrett等和1972年Coding 等以及1973年Douglas和Ginther等首次用PG或其類似物對家畜進行肌肉、皮下或子宮頸注射法進行綿羊同期發(fā)情,都取得了理想效果。
20世紀(jì)80年代以后,人們從激素的搭配和使用劑量等方面展開了廣泛研究,特別是進入九十年代后,由于胚胎移植技術(shù)在生產(chǎn)中的應(yīng)用,加速了同期發(fā)情技術(shù)的研究與應(yīng)用,形成了多種處理方法,但基本方法是兩種:孕激素—促性腺激素和PG注射法,只是在這些激素使用劑量和注射時間以及激素搭配方面不同。
3.3同期發(fā)情處理方法
經(jīng)過多年來的研究與應(yīng)用,形成了兩種主要方法:孕激素+促性腺激素法和PG注射法,孕激素使用方法有兩種:皮下埋植和陰道栓,其中陰道栓最常用。
3.3.1孕激素陰道栓法。
這種方法是將孕激素以海綿栓或有效釋放裝置如CIDR等形式埋置在陰道,預(yù)處理一定時間。2002龐訓(xùn)勝比較了孕酮陰道栓處理12 ,14 ,16 天的96 hr 的發(fā)情率,認(rèn)為以12 天為最佳孕酮陰道栓處理天數(shù)。
由于孕激素短期處理后發(fā)情率較低,因此在陰道栓中加入一定比例的雌激素或處理開始時注射一定的雌激素以加速黃體消退,處理結(jié)束后給予一定量的GnRH或FSH、PMSG ,以促進卵泡發(fā)育和排卵,提高受胎率。因此孕激素陰道栓配合促性腺激素又衍生出很多方法,如孕激素+GnRH,孕激素+FSH,孕激素+ PMSG 等。
1980 年,張儒學(xué)用甲孕酮配合垂體促卵泡素(FSH)和垂體促黃體素(LH)用陰道海棉栓在綿羊方面進行同期發(fā)情試驗,陰道海棉栓浸吸甲孕酮 60 mg 處理 16 d,取出后,肌肉注射 FSH 30~35 IU,8 h后肌肉注射 LH 15~22 IU,獲得的同期發(fā)情率 l00 %,受胎率為 78 %,產(chǎn)羔率為 142 %。1990年,陳家振等用孕激素+PG+PMSG 法,先用孕酮處理 7~9 d,然后注射 PGF2a和 PMSG,同期發(fā)情率為 86 %。1999年Ishida,N.在試驗?zāi)秆蜿幍纼?nèi)放置CIDR 12d,,撤出裝置前一天注射馬絨毛膜促性腺激素12d 后,分3 組,第一組注射GnRH 100mg,第二組HCG 500ug,第三組給予2ml 的鹽水對照,于取出裝置后44-45h 人工授精,受胎率、繁殖率、產(chǎn)羔率差異不顯著。
孕激素陰道栓+PMSG 法最常用,目前被認(rèn)為是最適用于綿羊,既簡便效果又好的一種方法,國外試驗所得的受胎率為34-100%,國內(nèi)張居農(nóng)試驗所得試驗結(jié)果表明,大范圍推廣時也能得到80%的受胎率。1982年,J.N.BShrestha等人采用40mg的FGA浸滲的陰道栓處理12-14d,撤栓時肌肉注射500IU 的溶于生理鹽水的PMSG,在無角陶賽特羊、薩福克羊和北方雪維特羊上分別得到79%、51%,和65%的受胎率。2004年楊梅等實驗得出,利用埋植CIDR + PMSG同期化處理綿羊, 完全可以對乏情期的綿羊進行同期發(fā)情處理,而且可采用定時輸精,無需通過試情公羊來鑒定母羊發(fā)情,可以減少勞動力。
目前國內(nèi)使用的孕酮栓有兩種:CIDR和海綿栓。CIDR價格較海綿栓高,但效果要好于海面栓,任志強等2002年對魯白山羊進行同期發(fā)情處理,認(rèn)為CIDR 是一種很有效的同期發(fā)情藥物,CIDR 配合PMSG效果好于注射氯前列烯醇方法。從開始放置CIDR 到第16 d 時取出,放置時間長,對發(fā)情反應(yīng)、卵泡活力、排卵率并無顯著的影響。取CIDR 栓后不足24 h ,便出現(xiàn)明顯強烈的發(fā)情表現(xiàn),發(fā)情率88.2%。
3.3.2 PG處理方法
用PG對羊進行同期發(fā)情,必須是繁殖季節(jié)已到,母羊即將進入發(fā)情周期時。綿羊發(fā)情周期的第4d~16d,PG處理才有效,由于羊的黃體在上次排卵后第5d和第4d才對PG敏感,故一次PG處理后的發(fā)情率理論值為70%左右;因此通常采用兩次注射PG或其類似物。第一次注射PG 10-14d后再次進行PG處理。PGF2α的用量是肌注4mg~6mg,PGc的用量是50μg~100μg。PG同期發(fā)情后第一情期的受胎率較低,第二情期相對集中且受胎率正常。1997
年張?zhí)烀竦热私?jīng)過一系列的試驗證明,采用1次陰唇注射氯前列烯醇0.05mg,并同時注射300IU PMSG和LRH-A2100mg
做輔助處理,96h 同期發(fā)情率為100%,情期產(chǎn)羔率為100%。2002年田樹軍等在山羊上采用間隔8天兩次注射PG的方法,取得了88.9%(0-72h)的同期效果。閆金華等(2005)認(rèn)為對進行一次同期處理未發(fā)情的山羊,在第一次處理后第10 天進行第二次補注,每只羊注射氯前列烯醇0.6 ml 同樣可達到提高同期發(fā)情率( 96.89 %97.6 % ) 、發(fā)情母羊數(shù) 2003年趙霞等人比較了PG、CIDR+PMSG、孕酮海綿栓+PMSG等方法對山羊進行同期發(fā)情處理,結(jié)果三種方法發(fā)情率無顯著差異,但PG處理組黃體合格率(77.78%)顯著低于CIDR+PMSG組(97.70%)、孕酮海綿栓+PMSG(97.08%)。從降低每只同期發(fā)情羊的處理成本考慮,處于發(fā)情季節(jié)的羊宜采用PG方法, 若要求達到發(fā)情周期化的羊數(shù)量不大,而可供同期處理的羊數(shù)量足夠大時,可采用一次注射的處理方法,從而通過降低注射次數(shù)來降低同期發(fā)情羊處理成本(田樹軍2002)。

3.4影響同期發(fā)情效果的主要因素

同期發(fā)情技術(shù)是一項綜合技術(shù),其效果受多種因素影響,如被處理羊的狀況,處理方法,藥品質(zhì)量、激素劑量,處理的時間等因素對發(fā)情的效果及受胎率都會產(chǎn)生較大影響。
3.4.1
羊的生理狀況

被處理母羊是影響同期發(fā)情效果的重要因素之一,好的同期發(fā)情處理方法,只有在羊身體素質(zhì)良好和生殖機能正常、無生殖道疾病、獲得良好的飼養(yǎng)管理時才能得到好的效果。
在實際生產(chǎn)應(yīng)用中,綿羊?qū)ν庠醇に氐姆磻?yīng)低于山羊,且不穩(wěn)定。李俊杰等(2004)利用孕酮栓+PMSG+PG方法對綿羊和山羊進行同期發(fā)情處理,0-72h 綿羊同期率為80.5%,顯著低于山羊96.3%的同期率。
由于不同品種羊初情期和利用年限不同,因而不同品種同一年齡羊可能得出不同的結(jié)果。馬世昌等(2005)比較不同年齡的小尾寒羊同期發(fā)情效果,14 歲之間,隨羊年齡增加,同期發(fā)情率有明顯的增高趨勢,34 歲的母羊比13 歲母羊提高了21.5個百分點。而同年和占星等人在夏季用CIDR + PMSG法對云嶺黑山羊及其雜種羊進行同期發(fā)情處理,結(jié)果表明: 12.5 歲受體羊的發(fā)情率比35 歲羊高17.74 個百分點( P < 0.05) ,移植率高11.06 個百分點( P > 0.05)
另外卵巢機能狀況直接影響同期發(fā)情效果,高建明等(2006)試驗結(jié)果表明具有正常發(fā)情周期活動的母羊同期發(fā)情率好于未知發(fā)情周期正常的母羊,采用陰道埋置孕酮海綿栓+肌肉注射PMSG方法同期發(fā)情效果分別為96.8 % 81.4 %; 肌肉注射PG的方法同期率為92.3 % 23.8 %
3.4.2
處理方法

不同的處理方法對同期發(fā)情效果影響較大,1993 年,譚景和等人分別用提純 FSH、PG、孕酮、PMSG 對綿羊進行超排和同期發(fā)情試驗,結(jié)果用孕酮同步法優(yōu)于用 PGF2a 法。陳兵2003年研究比較了孕酮栓處理時間對發(fā)情持續(xù)時間和撤栓至發(fā)情時間間隔的影響,認(rèn)為短期法(D=5)諾孕酮海綿栓放置5d同期發(fā)情效果要好于長期法(D=13)。2004年肖西山等人采用孕激素+PMSG和前列腺素(氯前列稀醇)兩種方法處理山羊,結(jié)果表明孕激素+PMSG組比氯前列稀醇處理組同期發(fā)情率高出23.38個百分點。2004年季尚娟比較分別用CIDR(處理1)、CIDR+PG(處理2)、 CIDR+PG+PMSG(處理3)處理徐淮山羊比較同期發(fā)情的效果。CIDR+PG十PMSG處理組 0-24h的發(fā)情率最高(34.3%);而同期率、總的發(fā)情率、受體山羊移植后妊娘率各處理間的差異均不顯著;胚胎移植中實際可利用羊數(shù)量以陰道栓法最高;未排卵受體山羊三組之間差異不顯著(9.375%、0、4% );一側(cè)黃體數(shù)目3個或者三個以上的受體山羊,以CIDR+PG+PMSG最高。馬世昌人(2006)用PGPMSG結(jié)合CIDRS 處理寧夏寒灘雜種綿羊母羊均獲得了較好的同期發(fā)情效果,其中PG處理組72 h 同期發(fā)情率為73.33 % ,PMSG處理組為83.33 %PG處理組羊發(fā)情時間主要集中于處理后024 h 2448 h ,PMSG處理組羊發(fā)情時間主要集中于處理后的2448 h,其中PG結(jié)合CIDRS 處理成本較低。
孕酮栓方法對處于繁殖季節(jié)和非繁殖季節(jié)(即乏情季節(jié)) 的羊均有效,PG方法僅對處于繁殖季節(jié)的羊有效。從降低每只同期發(fā)情羊的處理成本考慮,處于發(fā)情季節(jié)的羊宜采用PG方法,處于非發(fā)情季節(jié)(即乏情季節(jié)) 的羊宜采用孕酮栓方法(田樹軍等2002)。
3.4.3藥品的質(zhì)量和激素使用劑量。
在孕激素類的埋植物和陰道栓方面,我國尚無一家標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)模化生產(chǎn)的廠家,產(chǎn)品的質(zhì)量和同期發(fā)情效果難以保證。在生產(chǎn)中使用進口的孕激素產(chǎn)品,因價格過高而不現(xiàn)實,只能在一些科學(xué)試驗中使用。國產(chǎn)的PGc,由于生產(chǎn)規(guī)模小,可能會出現(xiàn)批次間質(zhì)量不穩(wěn)定的問題(桑潤滋主編《動物繁殖生物技術(shù)》)。
在使用相同的處理方法,激素劑量不同也會對同期發(fā)情效果產(chǎn)生較大影響。田樹軍等(2004)試驗研究對哺乳母羊注射250 IU/ 只孕馬血清促性腺激素羊的同期發(fā)情率(90.0 %) 明顯好于注射330IU/ 只孕馬血清促性腺激素的羊(68.8 %)
3.4.4處理時間
季節(jié)是影響羊同期發(fā)情處理效果的一個重要因素。1999年,楊永林等人在中國美利奴羊上做同期發(fā)情和凍胚移植中,用孕激素陰道海棉栓處理14d,撤栓時肌肉注射PMSG 500IU,同期發(fā)情率在繁殖季節(jié)和非繁殖季節(jié)分別為53%、66%,受胎率分別為20%、55%。何生虎(2003)在不同季節(jié)用同一種藥物處理受體羊,認(rèn)為4 6 月份同期發(fā)情效果明顯比11 月份差,11 月份處理的受體羊同期發(fā)情率、移植率、妊娠率分別達93.5%70.9 %58.0 %趙永聚等(2004)比較春季、夏季、秋季和冬季對山羊同期發(fā)情效果的影響,結(jié)果表明:處理羊只的發(fā)情率以秋季最高,94.74 %;與春、夏、冬季相比差異極顯著(P < 0.01);以夏季發(fā)情率最低,僅為59.55 %;春季和冬季發(fā)情率分別為72.57%78.95% ,處于中等。
多年來,形成了兩種同期發(fā)情方法:二次注射前列腺素法(間隔11-13天)和孕激素長期處理法(12-14天)。雖然這些方法能夠誘導(dǎo)母羊發(fā)情,但是由于這種處理方法導(dǎo)致了個體之間的發(fā)情和排卵異步化(asynchrony),結(jié)果引起老化、變性的卵泡排卵或未發(fā)育成熟卵泡排卵,受精率較低,研究表明同期發(fā)情和超排的變異性與激素處理時卵巢上存在的大卵泡有關(guān),利用激素調(diào)控發(fā)情之前有必要使卵巢上黃體和卵泡狀態(tài)得到控制(Wildeus,2000)。因此,同期發(fā)情技術(shù)應(yīng)注重對卵泡的生長發(fā)育調(diào)控,使母羊間的卵泡生長發(fā)育趨于同步,達到同步排卵,這樣才能獲得較高的情期受胎率。總之,提高短時間內(nèi)集中發(fā)情率和情期受胎率是今后值得研究的重點方面。
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作者: xuhua    時間: 2008-6-23 13:26
這是你的繁殖seminar,還是你要發(fā)表的綜述啊?前者的可能性大一點吧!




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