不同水平硒酵母對奶牛抗氧化能力的影響

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　　不同水平硒酵母對奶牛抗氧化能力的影響
　　摘 要：本試驗選取8頭體況、奶產量、泌乳天數相近的奶牛，分為四組分別添加4種不同的預混料：①對照組不添加硒酵母而添加亞硒酸鈉，0.3mgSe/kg日糧，②～④添加硒酵母，硒水平分別為：②0.3mg/kg，③0.45mg/kg，④0.6mg/kg，試驗結束后，采集血樣同時制備血清，用于檢測硒含量和相關抗氧化能力指標。結果表明：與亞硒酸鈉相比，添加酵母硒可以提高全血硒含量及血清中總抗氧化能力(T-AOC)，谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力，降低丙二醛(MDA)含量;試驗中以酵母硒0.3 mgSe/kgDM 組的奶牛上述指標有顯著的改善。
　　關鍵詞：硒酵母 添加量 消化率
　　目前硒對動物機體的功效已被人們所熟悉，并且還發現高于國際標準建議的動物日糧中硒添加水平能夠帶來較好的效果。當前的動物預混料中普遍使用的是廉價的亞硒酸鈉作為硒源，它不僅毒性強用量不易掌握而且生物利用率低，會對環境造成污染。有機硒低毒高效的特點使它正在國際上逐步取代亞硒酸鈉作為預混料的硒源。硒酵母與其他有機硒相比有價格優勢推廣前景廣闊。目前已經知道有機硒可以提高機體的免疫和抗氧化能力，但關于硒酵母對奶牛抗氧化能力影響的報道還很少。本試驗研究了不同硒酵母添加量對奶牛抗氧化能力的影響，為硒酵母在奶牛上的應用和對奶牛營養調控提供參考。
　　1 試驗材料與方法
　　1.1 試驗動物
　　1.1.1選取宜昌京都奶牛場體況、奶產量、泌乳天數相近的8頭奶牛。
　　1.1.2分組與處理：將8頭奶牛隨機分為四組，采用4×4拉丁方設計：①對照組不添加硒酵母而添加亞硒酸鈉，0.3mgSe/kg日糧，處理組添加硒酵母，水平如下②0.3mgSe/kg，③0.45mgSe/kg，④0.6mgSe/kg。預飼期10天，正飼5天。
　　所用硒酵母為安琪酵母提供，每克酵母含硒量不低于1mg。
　　1.1.3 飼養管理
　　每天飼喂3次，先粗后精，精料一次2.8kg，擠3次奶，日糧成分見表1，自由采食草料和飲水。
　　表1 奶牛日糧成分

原料	含量（%）	原料	含量（%）
玉米	44	棉粕	9
大麥	12	啤酒糟	7
麩皮	10	預混料	5
菜粕	8	貝殼粉	5

　　1.2測定項目與方法
　　血樣：正飼最后一天，采集血樣40ml，其中20ml抗凝處理測全血硒含量，另20ml離心制備血清。
　　檢測指標：血硒，血清中總抗氧化能力(T-AOC)，超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)，谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-PX)活力。試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。
　　1.3 數據處理
　　采用SPSS13.0進行單因素方差分析，并進行驗后多重比較。
　　2 結果與分析
　　2. 1 不同水平酵母硒對全血硒含量的影響
　　由表2可以看出，隨著酵母硒添加量的提高，全血硒含量呈上升趨勢，添加酵母硒0.45Se/kgDM和0.6mgSe/kgDM比添加亞硒酸鈉0.3Se/kgDM分別提高26.67%和40%(P<0.01)，在相同水平添加量下酵母硒組比亞硒酸鈉組的全血硒含量高20%(P<0.05)。這說明奶牛機體可以吸收較高水平的酵母硒，其利用率比亞硒酸鈉高。
　　表2 不同水平酵母硒下全血硒、血清T-AOC、SOD、MDA、GSH-PX含量

	全血硒含量(mg/L)	GSH-PX	T-AOC	SOD(U/ml)	MDA(nmol/ml)
亞硒酸鈉0.3(mg/kg)	0.15±0.02Bc	110.70±4.82C	3.00±0.08B	167.64±16.66b	10.59±1.85a
酵母硒 0.3(mg/kg)	0.18±0.02ABb	159.54±13.49Aa	4.13±0.10A	193.31±16.38a	7.85±1.37b
酵母硒 0.45(mg/kg)	0.19±0.02Aab	143.71±11.01ABbc	4.02±0.71A	181.30±14.59a	9.07±1.29ab
酵母硒 0.6(mg/kg)	0.21±0.02Aa	132.76±2.64Bbc	3.83±0.18A	177.75±8.81a	10.23±0.78a

　　注：同列肩注不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)
　　2.2 不同水平酵母硒對血清GSH-PX的影響
　　本試驗添加酵母硒后，各組奶牛血清GSH-PX極顯著高于對照組(P<0.01)，試驗各組分別比對照組高44.12%，29.82%，19.93%;0.3水平的酵母硒組高出0.6水平20.17%(P<0.01)。隨著添加量的提高血清GSH-PX呈下降的趨勢。
　　2.3 不同水平酵母硒對血清總抗氧化能力的影響
　　添加酵母硒后，奶牛血清總抗氧化能力極顯著高于對照組(P<0.01)，隨著酵母硒添加量的提高分別比對照組高37.67%，34.00%，27.67%，而酵母硒組間并無差異，但隨著添加量的提高總抗氧化能力有下降的趨勢。
　　2.4 不同水平酵母硒對血清超氧化物歧化酶的影響
　　由表16可以看出血清SOD酶活的變化趨勢與T-AOC一致，并且與GSH-Px顯著正相關(r=0.987),與丙二醛顯著負相關(r=-0.955)。酵母硒組間SOD酶活并無差異，隨著酵母硒添加量的提高SOD分別比對照組顯著提高15.31%，8.15%，6.03%(P<0.05)。
　　2.5 不同水平酵母硒對血清丙二醛的影響
　　添加酵母硒后，MDA比對照組降低了，這與黃志堅(2004)報道有機硒能夠降低MDA的結果一致。其中0.3 mg/kg水平的酵母硒和對照組有顯著差異，下降了25.87%(P<0.05);說明0.3 mg/kg酵母硒水平可以有效降低不飽和脂肪酸脂質過氧化反應。但隨著添加量的提高血清中丙二醛含量有上升的趨勢，其中0.6水平比0.3水平顯著提高30.32%(P<0.05)。
　　3 討論
　　硒參與GSH-Px的合成,以促進過氧化氫或脂類過氧化物轉化成水和無害的酒精,防止脂類化合物的過氧化反應，保護細胞膜不受過氧化物的侵害,以維持細胞的正常結構和功能。所以人們常用GSH-Px酶活的高低作為硒在體內發揮生物活性的指示劑(Surai,2006b)。Gunter(2003)就曾報道過添加相同水平的酵母比亞硒酸鈉可以顯著提高奶牛全血硒含量和GSH-Px的活性。本試驗無機硒——亞硒酸鈉添加組血硒達到0.15mg/L，已在GSH-Px發揮生物活性的范圍內(60-150ng/ml) (Gunter,2003),添加酵母硒后血硒顯著增加達到0.18-0.21mg/L, 這與Nicholson(1991)Johansson(1990)報道的與無機硒相比，給反芻動物飼喂有機硒(酵母硒)能提高血液和組織中的硒濃度和提高GSH-PX的活性一致。另外Puls(1989)報道血硒在160-1200ng/ml時, 機體的GSH-Px活性最佳而且免疫功能也處于最佳狀態。由此可見添加酵母硒可以使奶牛機體處于最佳狀態。
　　機體抗氧化的防御體系有酶促和非酶促兩個。酶促體系中許多酶以微量元素為活性中心，如GSH-Px、SOD、過氧化氫酶(CAT)等，非酶促體系則包括括維生素E、維生素C、β-胡蘿卜素等。因此，T-AOC與機體內的多種因素有關。機體通過酶系統和非酶系統產生氧自由基，攻擊生物細胞膜中的不飽和脂肪酸引發脂質過氧化作用形成脂質過氧化物，如醛基(丙二醛)、酮基、羥基等,所以丙二醛的量可以反映機體內脂質過氧化的程度，間接反映細胞損傷程度。從本試驗可以看出,酵母硒0.3水平添加量的奶牛整體抗氧化能力最好,該能力隨添加量的提高呈下降趨勢。但Jukola(1996)曾報道如考慮硒對乳房炎的作用，全血中硒濃度應比0.18μg/ml高，或者血漿中硒達到約0.08μg/ml，本試驗0.45水平下全血硒含量恰好高于0.18 μg/ml，并且綜合上文Puls(1989)的報道及養分的表觀消化率來看0.45水平應該效果最好，因此對于酵母硒0.45添加量下，全血硒含量在機體最佳狀態范圍內，而測定血清中抗氧化能力反而下降這一現象，還有待進一步研究。
　　4 結論
　　與亞硒酸鈉相比，添加酵母硒可以提高全血硒含量及血清中總抗氧化能力(T-AOC)，谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力，降低丙二醛(MDA)含量;試驗中以酵母硒0.3 mgSe/kgDM 組的奶牛上述指標有顯著的改善。

劉廣

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