巴爾吡爾對畜禽常見病原菌體外抑菌效果觀察

畜牧人專題

　　完成單位：中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所
　　1  材料與方法
　　1.1  材料
　　1.1.1  藥品  巴爾吡爾和進口原液兩種藥液，均為水溶液，由北京娜爾生物技術有限公司提供。
　　1.1.2  菌種  馬腺疫鏈球菌C55100、金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸桿菌C83-1、豬傷寒沙門氏菌C78-2和魏氏梭菌均購自中國獸藥監(jiān)察所。無乳鏈球菌06413、大腸桿菌3#和停乳鏈球菌29系從蘭州、江蘇和大理采集的患臨床型乳房炎的病乳中分離、鑒定并凍干保存的菌種。
　　1.1.3  培養(yǎng)基  普通牛肉湯、7%羊血瓊脂斜面、水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基 (MH)。
　　1.1.4  不銹鋼管  外徑8mm，內(nèi)徑6mm，高10mm。
　　1.2  方法
　　1.2.1  杯碟法抑菌試驗  將凍干菌種開啟后，分別接種到普通牛肉湯中，37℃溫箱中培養(yǎng)20h，經(jīng)涂片鏡鑒純粹后，分別接種于血瓊脂斜面，37℃溫箱中培養(yǎng)20h后取出，置4℃冰箱中保存。試驗時將血斜面菌種分別接種于普通牛肉湯中，37℃溫箱中培養(yǎng)20h，經(jīng)涂片鏡鑒純粹后，將不同菌株的菌液進行不同倍數(shù)的稀釋（由與試驗確定）。將稀釋好的菌液用滅菌吸管吸取0.1ml，加到MH 平板上，并立即用涂抹棒將菌液均勻涂抹于整個瓊脂表面。平皿室溫放置5-10min，待菌液吸干后，將小鋼杯在酒精燈上微微燒灼，等距離立置在瓊脂表面上數(shù)個，然后將不同稀釋濃度的藥液分別加入鋼杯中，爾后平皿蓋換成陶瓦蓋，平置于37℃溫箱中培養(yǎng)24h，取出后用游標卡尺測量抑菌圈直徑。每株菌重復上述試驗2-3次，取平均值，即為該藥對此菌株的抑菌結(jié)果。
　　1.2.2  試管抑菌試驗  將巴爾吡爾藥液用肉湯進行稀釋，將藥液分別稀釋成1:5、1:10、1:20、1:40、1:80、1:160、1:320和1:640共8個稀釋度，每個稀釋度分別裝于8只試管（12mm×100mm）內(nèi)，每管2mL，再分別加入培養(yǎng)20h各菌株1000倍肉湯稀釋液0.05mL。另設一管藥物對照（不加菌液）和各菌株的細菌對照（2mL肉湯加0.05mL菌液），置于37℃溫箱培養(yǎng)24h后，判定抑菌效果。
　　1.2.3  殺菌試驗  按農(nóng)業(yè)部獸用消毒劑技術規(guī)范，采用試管內(nèi)2倍稀釋法進行。試驗前將24h肉湯培養(yǎng)物離心，棄去上清液，沉淀用0.03M磷酸鹽緩沖液制成一定濃度的細菌混懸液，并與標準比濁管比較，將菌液調(diào)整到試驗所需的活菌數(shù)。將巴爾吡爾藥液用滅菌蒸餾水進行對倍稀釋,每管2.5ml,然后加等量細菌懸液,混勻并計時,作用10min、20min和30min后，取0.5ml加入1.5ml中和劑（磷酸鹽緩沖液）、中和10min后，取0.5ml加到4.5ml營養(yǎng)肉湯中，37℃培養(yǎng)7d。以無菌生長的最大稀釋倍數(shù)作為本品的最小殺菌濃度（MIC），其作用時間為最短有效作用時間。并設營養(yǎng)肉湯及磷酸鹽緩沖液（代替消毒劑）為對照。

　　2  結(jié)果
　　表1   巴爾吡爾和進口原液杯碟法抑菌試驗結(jié)果     單位：直徑mm

菌  株	巴爾吡爾			進口原液
	原液	1:5	1:10	原液	1:5	1:10
馬腺疫鏈球菌C55100	17.56	0	0	23.57	13.59	11.69
金黃色葡萄球菌ATCC25923	13.74	0	0	16.62	0	0
大腸桿菌C83-1	21.30	0	0	24.36	13.92	0
豬傷寒沙門氏菌C78-2	16.67	0	0	20.68	12.72	11.15
無乳鏈球菌06413	22.09	0	0	25.46	13.97	11.85
大腸桿菌3#	19.78	0	0	22.87	12.75	0
停乳鏈球菌29	20.38	0	0	26.49	13.89	11.68
魏氏梭菌	18.40	0	0	20.96	11.65	0

　　表2  巴爾吡爾殺菌試驗結(jié)果

菌  株	10min			20min			30min
	1:10	1:20	1:40	1:10	1:20	1:40	1:10	1:20	1:40
馬腺疫鏈球菌C55100	+	+	+	+	+	+	+	+	+
金黃色葡萄球菌ATCC25923	+	+	+	+	+	+	+	+	+
大腸桿菌C83-1	+	+	+	+	+	+	+	+	+
豬傷寒沙門氏菌C78-2	+	+	+	+	+	+	+	+	+
無乳鏈球菌06413	+	+	+	+	+	+	+	+	+

　　注：+為細菌生長，-為細菌不生長
　　表3  巴爾吡爾和進口原液試管法抑菌試驗結(jié)果

菌  株

巴爾吡爾

進口原液

1:5

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

1:5

1:10

1:20

1:40

1:80

1:160

1:320

1:640

馬腺疫鏈球菌C55100

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金黃色葡萄球菌ATCC25923

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大腸桿菌C83-1

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豬傷寒沙門氏菌C78-2

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無乳鏈球菌06413

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大腸桿菌3#

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停乳鏈球菌29

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魏氏梭菌

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　　注：+為細菌生長，-為細菌不生長
　　3  結(jié)論
　　巴爾吡爾和進口原液不稀釋對畜禽常見病原菌均有較好的抑菌效果，但做1：5和1：10稀釋后無抑菌效果或抑菌效果很差。試管對倍稀釋法抑菌試驗結(jié)果表明，巴爾吡爾對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌C83-1、豬傷寒沙門氏菌C78-2、大腸桿菌3#、停乳鏈球菌和魏氏梭菌的有效抑菌濃度為1：10，對馬腺疫鏈球菌和無乳鏈球菌的有效抑菌濃度為1：20。進口原液對金黃色葡萄球菌和停乳鏈球菌的有效抑菌濃度為1：40；對大腸桿菌C83-1、豬傷寒沙門氏菌C78-2、大腸桿菌3#、和魏氏梭菌的有效抑菌濃度為1：80；對馬腺疫鏈球菌和無乳鏈球菌的有效抑菌濃度為1：320。

海鹽調(diào)味品

謝謝分享，看名字以為是管理員……

huig5182005

感恩分享！