赭曲霉毒素快檢

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1. 概要

赭曲霉毒素A主要是由赭曲霉（Aspergillus ochraceus）和純綠青霉 (Penicillium viridicatum)產(chǎn)生的一種霉菌腎毒素，存在于糧食（小麥、玉米、大麥、燕麥、黑麥、大米和黍類等）、花生、蔬菜（豆類）等農(nóng)作物上。赭曲霉毒素A主要侵害動(dòng)物肝臟與腎臟，引起腎臟損傷，大量的毒素也可能引起動(dòng)物的腸黏膜炎癥和壞死。產(chǎn)生赭曲霉毒素A的霉菌（如赭曲霉、純綠青霉等）普遍存在，赭曲霉毒素A的污染可以發(fā)生在植物的生長(zhǎng)、收獲、加工、貯藏和運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程中。中國(guó)規(guī)定谷物、豆類及其制品中赭曲霉毒素A不得超過(guò)5μg/kg，歐盟規(guī)定谷物、豆類及其制品中赭曲霉毒素A不得超過(guò),3μg/kg。iCheck®赭曲霉毒素A定量快檢卡可以快速定量的檢測(cè)小麥及其制品中0-20ppb的赭曲霉毒素A含量。

2. 赭曲霉毒素A定量快檢卡測(cè)試包組成

1) iCheck®赭曲霉毒素A快檢卡（25個(gè)）

2) OTA微孔（25個(gè)）

3) 稀釋緩沖液CSB-1（5mL）

4) 200μL吸頭（50個(gè)）

5) OTA電子標(biāo)定卡（1個(gè)）

6) 操作說(shuō)明書

3. 試驗(yàn)需要的設(shè)備

1）200μL 、1000μL微量移液器（各1支）

2）iCheck® 定量快檢儀(帶零點(diǎn)校正片)

3）多用途旋轉(zhuǎn)搖床       4）計(jì)時(shí)器                      5) 電子稱               6）純水，或二次蒸餾水        7）提取液：甲醇+水（70+30）   

8）漏斗                 9）定性濾紙  

10）50mL離心管

4. 試驗(yàn)前的準(zhǔn)備與儀器標(biāo)定

1）使用前將快檢卡、緩沖液和待檢樣品恢復(fù)至室溫30分鐘。

2）設(shè)備零點(diǎn)校正：將零點(diǎn)校正片插入定量快檢儀測(cè)定室，點(diǎn)擊“零點(diǎn)校正”即可。

3）設(shè)備標(biāo)定：將OTA電子標(biāo)定卡插入定量快檢儀卡槽中，點(diǎn)擊讀取“進(jìn)行標(biāo)定”即可。測(cè)定時(shí)，不得將電子標(biāo)定卡取出。

4）根據(jù)測(cè)定樣品數(shù)量，打開(kāi)包裝袋，取出快檢卡和OTA微孔，將OTA微孔置于微孔架上。

5. 樣品處理與檢測(cè)

1）稱取5.0g粉碎(20目過(guò)篩)的玉米（或者大米）樣品于50mL離心管中，加入25.0mL 70%甲醇水提取液，置于旋轉(zhuǎn)搖床上旋轉(zhuǎn)振蕩提取5分鐘(或用高速均質(zhì)器均質(zhì)1分鐘，或用手劇烈振蕩3分鐘)。

2）用定性濾紙過(guò)濾，取120μL 稀釋緩沖液CSB-1于OTA微孔中，加入濾液30μL，用移液器吸打5次混勻，取100μL加入到快檢卡樣品孔中。

3）37℃（±2℃）反應(yīng)10分鐘后，立即將快檢卡放入定量快檢儀中，點(diǎn)擊“分析”讀數(shù)，即為樣品實(shí)際濃度。

6. 結(jié)果判定

1）檢測(cè)范圍：0-20ppb，定量限2.5ppb。

2）此檢測(cè)卡為定量快檢卡，若控制線（C）無(wú)紅線出現(xiàn)，表明快檢卡失效。

3）如果測(cè)定值大于內(nèi)部或標(biāo)準(zhǔn)限量值的80%（如大于4 ppb），請(qǐng)?jiān)僦匦聹y(cè)定一次。如果還是大于上述值，請(qǐng)用儀器法進(jìn)行確認(rèn)分析。

4）如果測(cè)定值大于20ppb，請(qǐng)將樣品提取液的濾液用70%甲醇水進(jìn)行稀釋，最后定量快檢儀

的讀數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品實(shí)際濃度。

7. 注意事項(xiàng)

1) 快檢卡在保質(zhì)期內(nèi)一次性使用。2-8℃冰箱保存使用前應(yīng)平衡至室溫后再開(kāi)袋使用。

2) 謹(jǐn)防快檢卡受潮，鋁箔包裝袋受損或快檢卡受潮后，檢測(cè)卡不要使用。

3) 盡量不要觸摸快檢卡中央的白色膜。

4) 所有溫育過(guò)程應(yīng)避免陽(yáng)光直射。

5) 鋁箔包裝袋中的小包是干燥劑，不可誤服。

6) 超過(guò)保質(zhì)期不可使用。