油脂TBA值的測定方法 探討

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油脂TBA值的測定方法            GB/T5009.181－2003《豬油中丙二醛的測定》
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原理
                 油脂受到光、熱、空氣中氧等的作用，發生酸敗。分解出醛、酮之類的化合物。丙二醛就是分解產物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長處有吸收高峰，利用此性質即能測出丙二醛含量，從而推導出油脂酸敗的程度。
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試劑

1、0.02mol/L TBA水溶液：稱取TBA0.288g加熱溶于水中，并稀釋至100ml；

2、三氯乙酸混合液：稱取三氯乙酸7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml；

3、氯仿（分析純）；

4、丙二醛標準溶液：稱取0.315g 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000ml，此溶液每ml相當于丙二醛100μg，置于冰箱內保存。準確吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每ml相當于丙二醛10μg，備用。
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操作步驟
1、標準曲線的繪制
           準確吸取上述標準溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5ml TBA溶液，然后按樣品測定步驟進行，測得吸光度并繪制標準曲線。
2、樣品制備與檢測
            準確稱取均勻的豆油30g（視氧化產物含量而定 ），置于100ml具塞三角瓶內，加入25ml三氯乙酸混合液，振搖半小時（保持油脂融溶狀態），用四層濾紙過濾，除去油脂。
            準確移取上述濾液5ml置于25ml比色管內，加入TBA溶液5ml，混勻，加塞，置于90℃水浴內保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內，離心5min，上清液傾入25ml納氏比色管中，加入5ml氯仿，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長比色（同時作空白試驗）。
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結果計算

       丙二醛含量（mg/Kg）=C×20/5m

         式中：C—從標準曲線查得丙二醛的相應濃度(μg/ml)

         m─油脂質量（g）

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請教各位公式中的系數20和5是怎么樣得來的？謝謝

蒙培慧

你這個操作過程中‘加入25ml三氯乙酸混合液“的25ml“是否有問題？我看到有些檢測過程是加50ml，然后計算公式是丙二醛含量（mg/Kg）=C×50/5m，我的理解是那5ML是檢測抽樣量，50ML是油油于三氯乙酸溶液總量。